p299 - La leishmaniose cutan?e en Tunisie. Apport de la technique PCR dans le diagnostic
H?Korchani?(1), N?Chargui?(2), N?Haouas?(2), F?Akrout?(3), J?Zili?(1), R?Azaiez?(2), H?Mezhoud?(2), H?Babba?(2)
(1)Service de Dermatologie, H?pital Universitaire Fattouma Bourguiba, Monastir, Tunisie
(2)Laboratoire de Parasitologie, H?pital Universitaire Fattouma Bourguiba, Monastir, Tunisie
(3)Laboratoire d'Hygi?ne, H?pital Universitaire H?di Chaker, Sfax, Tunisie.
Mots cl?s : Leishmaniose cutan?e (PCR).
Introduction
La leishmaniose cutan?e est une anthropozoonose due ? des zooflagell?s du genre leishmania. Le diagnostic est surtout parasitologique par d?tection du parasite par examen direct et par culture sur milieux sp?cifiques. La PCR est une technique plus sensible par sa capacit? de rendre un agent infectieux d?tectable ? l'?tat de trace. Le but de cette ?tude est de pr?ciser l'apport de la PCR dans le diagnostic des leishmanioses cutan?es ? travers une s?rie collig?e au centre tunisien.
Mat?riel et m?thode
264 ?chantillons ont ?t? pr?lev?s chez des patients suspect?s avoir une leishmaniose cutan?e. La PCR a ?t? r?alis?e suivant le protocole d?crit par Lachaud et coll. [1] et optimis? dans notre laboratoire en utilisant les couples d'amorces R332 et R221 d?crits par Eys et coll. [2]. Les contr?les positifs ont ?t? effectu?s sur des souches de r?f?rence transf?r?es du centre international de cryoconservation de caract?risation enzymatique taxonomique de leishmania. Les contr?les n?gatifs ont ?t? r?alis?s avec l'eau distill?e. Chaque ?chantillon a ?t? test? deux fois en deux jours diff?rents. Les ?chantillons n?gatifs ont ?t? contr?l?s par une autre amplification avec les amorces BG1 et BG2 qui s'hybrident avec le g?ne codant pour la b?ta globuline humaine.
R?sultats
La pr?sence d'ADN leishmanien a ?t? d?tect?e chez 161 patients (soit 60,98?%) alors qu'avec l'examen parasitologique direct, il n'a ?t? possible de d?tecter le parasite que chez 127 patients (soit 48,1?%). Aucun cas d'inhibition de l'amplification n'a ?t? observ? dans les pr?l?vements n?gatifs. La sensibilit? de la PCR a ?t? de 99?% contre 78?% pour l'examen parasitologique direct.
Commentaires
La leishmaniose zoonotique est la forme la plus fr?quente en Tunisie. Elle est end?mo-?pid?mique dans le centre et le sud tunisien. Dans le diagnostic des leishmanioses cutan?es, nous avons d?montr? que la PCR ?tait plus sensible que l'examen direct. L'int?r?t de la PCR se manifeste surtout pour les pr?l?vements pauvres en leishmani. Nos r?sultats concordent avec ceux de la litt?rature, la plupart des ?tudes rapportent une sensibilit? variant de 75?% ? 100?% [3, 4].
Conclusion
La PCR est une technique qui am?liore la qualit? du diagnostic biologique des leishmanioses cutan?es avec une bonne sensibilit?.
[1] Lachaud L, Chabbert E, Dubbessay P, Reynes J, Lamothe J, Bastien P. Comparaison of various sample preparation methods for PCR diagnosis of visceral leishmaniasis using periphearl blood. J Clin Microbiol 2001?; 39?: 613-7.
[2] Eys GJJMV, Schoone GJ, Kroon CCM, Ebeling SB. Sequence analysis of small subunit ribosomal RNA genes and its use for detection and identification of leishmania parasites. Mol Biochem Parasitol 1992?; 51?: 133-42.
[3] Belli Rodriguez B, Ariles H, Harris E. Simplified polymerase chain reaction detection of new world leishmania in clinical specimens of cutaneous leishmaniasis. Am J Trop Med Hyg 1998?; 58?: 102-9.
[4] Rodriguez EHG, Brito MEF, Mendon?a MG, Werkhauser RP, Coutinho EM, Souza WV, Albuquerque MFM, Abath FCG. Evaluation of PCR for diagnosis of american cutaneous leishmaniasis in an area of endemicity in Northeastern. J Clin Microbiol 2002?; 40?: 3572.
