p86 - R?le des peptides d'?lastine dans l'amplification de la r?ponse tumorale du m?lanome
AL?Labrousse?(1), C?Ntayi?(1), W?Hornebeck?(2), P?Bernard?(1)
(1)Laboratoire de Dermatologie, CNRS FRE 2534, Facult? de M?decine, Reims
(2)Laboratoire de Biochimie, CNRS FRE 2534, Facult? de M?decine, Reims.
Mots cl?s : M?lanome (?lastine).
Introduction
La prot?olyse de la matrice extra-cellulaire (MEC) est un pr?-requis ? l'invasion tumorale, afin de faciliter la migration et la diss?mination cellulaire. In vitro, la d?gradation enzymatique de l'?lastine, principal constituant des fibres ?lastiques (FE) cutan?es, g?n?re des peptides solubles d'?lastine (PSE), pour lesquels l'interaction de la s?quence Val-Gly-Val-Ala-Pro-Gly (VGVAPG) avec un r?cepteur ubiquitaire de 67 kDa (S-gal), est capable de moduler, selon le type cellulaire, la croissance cellulaire, le chimiotactisme, l'expression et l'activation de prot?ases [1]. Notre ?tude avait pour buts d'analyser, dans le m?lanome, les interactions in situ au front d'invasion (FI), entre cellules tumorales et FE?; de rechercher in vitro les effets des PSE sur l'invasivit? de cellules de lign?es de m?lanome humain et sur l'expression et l'activation de la MMP-2, m?talloprot?ase matricielle particuli?rement impliqu?e dans la progression tumorale du m?lanome [2] et poss?dant une activit? ?lastasique.
Mat?riels et m?thodes
Les coupes histologiques de 9 m?lanomes et 5 naevus ont ?t? color?es par l'orc?ine pour visualiser les fibres ?lastiques (FE), puis analys?es de fa?on morphologique et quantitative. Par technique immunohistochimique, ont ?t? recherch?es les expressions 1) de S-gal, MMP-2, MT1-MMP et de l'inhibiteur TIMP-2 par les cellules tumorales et stromales?; 2) de la s?quence VGVAPG sur les FE. Des lign?es de m?lanome ont ?t? cultiv?es sur support plastique recouvert de PSE, en pr?sence ou non de lactose (diminuant l'affinit? de S-gal pour les PSE), puis dans une matrice tridimensionnelle de collag?ne de type I contenant des PSE, en pr?sence ou non d'inhibiteurs (rec-TIMP-2, anti-S-GAL). L'expression et l'activation des prot?ases (MMP-2, MT1-MMP) ?taient analys?es (zymographie, immunoblot), ainsi que l'expression du TIMP-2 (zymographie inverse, immunoblot).
R?sultats
Une importante d?gradation des FE jusqu'? leur absence compl?te ?tait not?e au sein de la tumeur et au FI des m?lanomes les plus ?pais, alors qu'elles ?taient fr?quemment conserv?es au sein du naevus et augment?es dans sa profondeur. L'?lastolyse s'observait ?galement au contact des fibroblastes, macrophages, et lymphocytes au FI. La s?quence VGVAPG ?tait exprim?e ? la p?riph?rie des FE, et le r?cepteur S-gal, par les cellules tumorales et stromales. Parall?lement, la MMP-2 et son activateur la MT1-MMP, ?taient largement co-exprim?es au FI des m?lanomes ?pais, sugg?rant l'activation de la MMP-2 ? l'interface tumeur-MEC. Le TIMP-2 n'?tait pas exprim? (internalis? ou d?grad? lors de l'activation de la MMP-2??). Sur plaques recouvertes par les PSE, les expressions de MMP-2, MT1-MMP et de TIMP-2 ?taient augment?es, mais sans activation de la MMP-2, tandis que la prolif?ration cellulaire n'?tait pas modifi?e. Ces effets ?taient m?di?s par le r?cepteur S-gal, car inhib?s par le lactose. En suppl?mentant les lattis de collag?ne avec des PSE, l'invasivit? des cellules de m?lanome ?tait significativement augment?e, accompagn?e d'une augmentation de l'activation de la MMP-2 et d'une diminution de la production de TIMP-2. L'invasivit? ?tait partiellement inhib?e en pr?sence de rec-TIMP-2 ou de l'anticorps anti-S-gal.
Conclusion
Les m?lanomes ?pais se caract?risent par une ?lastolyse importante, lib?rant des PSE au FI. Ces PSE, par la voie du r?cepteur S-gal reconnaissant la s?quence VGVAPG, contribuent ? augmenter l'invasivit? des cellules de m?lanome, en activant la MMP-2. Nos r?sultats sugg?rent ?galement que des cellules stromales (fibroblastes, cellules endoth?liales) pourraient participer ? l'amplification de la r?ponse tumorale.
[1] Brassart B et al. Clin Exp Metastasis 1998?; 16?: 489-500.
[2] Hofmann UB et al. J Pathol 2000?; 191?: 245-56.
