c96 - R?pertoire, ph?notype fonctionnel et s?cr?tion cytokinique des lymphocytes T au cours du syndrome d'hypersensibilit? m?dicamenteuse
D?Picard?(1), S?Jacquot?(2), I?Dutot?(2), F?Tron?(2), P?Joly?(1), P?Musette?(1), Groupe «?Toxidermie?» de la SFD
(1)Service de Dermatologie, H?pital Charles Nicolle, CHU, Rouen
(2)Unit? INSERM 519, Facult? de M?decine et Pharmacie, Rouen.
Mots cl?s : DRESS (lymphocytes).
Introduction
Le syndrome d'hypersensibilit? m?dicamenteuse ou DRESS (drug reaction with eosinophilia and systemic symptoms) est une forme s?v?re de toxidermie dont la gravit? est li?e ? l'atteinte visc?rale associ?e. Cette pathologie constitue un mod?le d'?tude du r?le des lymphocytes T CD4+ et CD8+ dans les toxidermies du fait d'une activation lymphocytaire particuli?rement importante. Les m?dicaments les plus souvent en cause sont les anti-?pileptiques. Malgr? l'arr?t du m?dicament imputable, certains malades ont une ?volution prolong?e ou r?cidivante sur plusieurs semaines, sugg?rant la persistance de la r?action immunologique anormale d?clench?e par le m?dicament.
Mat?riels et m?thodes
10 patients atteints de DRESS ont ?t? inclus dans notre ?tude. Apr?s tri cellulaire CD4/CD8 par billes magn?tiques, une analyse du r?pertoire des lymphocytes a ?t? r?alis?e par la m?thode de l'immunoscope?: apr?s une reverse transcription des ARN des lymphocytes, les ADN compl?mentaires sont amplifi?s par une PCR utilisant ? la fois des oligonucl?otides sp?cifiques de chaque famille V b et une sonde C b. Chaque produit d'amplification est ensuite soumis ? une ?longation d'amorce avec une sonde C b fluorescente. La diversit? de longueur des produits est enfin analys?e sur un gel d'acrylamide ? l'aide d'un s?quenceur automatique. La pr?sence d'une ou plusieurs populations lymphocytaires T en expansion est r?v?l?e par un pic dans une famille V b donn?e. Le ph?notype lymphocytaire ?tudiant particuli?rement des marqueurs d'activation (CD 25, CD69, CD134, CD45 RO, HLA DR) et le profil d'expression cytokinique par marquage intracytoplasmique de cytokines (IL2, IL5, IFNg, TNFa, IL4, IL8, IL5, IL13 et IL10) ?taient r?alis?s par cytom?trie en flux sur des pr?l?vements sanguins effectu?s ? J5, J30 et J90. Lorsque l'?tude par immunoscope mettait en ?vidence un biais de r?pertoire avec une population lymphocytaire en expansion utilisant une famille V b particuli?re, le ph?notype et la production de cytokines ?taient secondairement caract?ris?s au sein de ces populations ? l'aide d'anticorps anti Vb correspondants.
R?sultats
L'analyse par immunoscope montrait chez 9 patients sur 10 un biais de r?pertoire. La population en expansion ?tudi?e en cytom?trie en flux repr?sentait chez les patients de 5 ? 21?% du total des lymphocytes T CD8+. L'?tude du ph?notype lymphocytaire retrouvait un ph?notype d'activation (CD25, CD69, HLA DR) des lymphocytes T CD8+. L'expression de ces marqueurs d'activation diminuait progressivement de J5 ? J90 apr?s le d?but des signes cliniques. A J5, le profil de s?cr?tion cytokinique montrait en moyenne que 27?% des lymphocytes T CD4+ et 19?% des lymphocytes T CD8+ produisaient du TNFa, 6?% des CD4+ et 20?% des CD8+ de l'IFNg, 34?% des CD4+ et 14?% des CD8+ de l'IL2, et 0,2?% des CD4 et 0, 8?% des CD8 de l'IL5. De fa?on paradoxale, la proportion de cellules produisant ces cytokines augmentait progressivement de J5 ? J90 ? la fois dans les populations CD4+ et CD8+. L'?tude ph?notypique des populations en expansion a permis de mettre en ?vidence que celles-ci exprimaient plus de marqueurs d'activation et s?cr?taient plus d'IFNg, de TNFa et d'IL2 que les autres populations lymphocytaires.
Commentaires
Cette premi?re ?tude ex vivo r?alis?e sur une s?rie de malades atteints de DRESS confirme le ph?notype «?activ?» des lymphocytes T, plus marqu? au sein de la population CD8+. Le profil de s?cr?tion cytokinique des lymphocytes T CD4+ est orient? vers Th1 et de mani?re paradoxale, la proportion de lymphocytes T CD4+ et CD8+ s?cr?tant de l'IFNg et du TNFa augmente de J5 ? J90, pouvant expliquer les r?cidives de la maladie ? la d?croissance de la corticoth?rapie. L'?tude des populations cellulaires en expansion CD8+, dont on peut penser qu'elles sont responsables des l?sions, montre qu'elles expriment plus de marqueurs d'activation et participent de mani?re pr?dominante ? la s?cr?tion d'IFNg et de TNFa.
[1] The drug hypersensitivity syndrome. What is the pathogenesis?? Arch Dermatol 2001?; 137?: 357-64.
[2] T-cell repertoire diversity and clonal expansions in normal and clinical samples. Immunol Today 1995?; 16?: 176-181.
