c88 - Des lymphocytes T r?gulateurs sont pr?sents chez les patients atteints de m?lanome stade III et sont susceptibles de s'opposer ? la r?ponse immunitaire anti-tumorale
M?Viguier?(1), F?Lema?tre?(1), O?V?rola?(2), A?Lim?(1), P?Kourilsky?(1), H?Bachelez?(3), L?Feriradini?(1)
(1)U 277, Institut Pasteur, Paris
(2)Laboratoire d'Anatomo-Pathologie, H?pital Saint-Louis, Paris
(3)Service de Dermatologie I, H?pital Saint-Louis, Paris.
Mots cl?s : M?lanome (lymphocytes T r?gulateurs).
Introduction
Les lymphocytes T (LT) dits «?r?gulateurs?» de ph?notype CD4+CD25high contr?lent l'activit? d'autres populations lymphocytaires en la modulant. Ils jouent un r?le important chez la souris dans la pr?vention des maladies auto-immunes et pourraient, a contrario, neutraliser la r?ponse immunitaire anti-tumorale [1]. Nous avons cherch? ? identifier et ? caract?riser de telles cellules au cours du m?lanome chez l'homme, dans la mesure o? la pr?sence de ces cellules aux sites tumoraux pourrait contribuer ? expliquer les difficult?s rencontr?es ? engendrer une r?ponse immunitaire efficace.
Malades et m?thodes
Douze patients atteints de m?tastases ganglionnaires de m?lanome (stade III) subissant un curage ganglionnaire carcinologique ont ?t? inclus. Les crit?res d'exclusion ?taient l'existence de m?tastases visc?rales, un traitement ant?rieur par chimio ou immunoth?rapie et la prise d'un traitement immuno-suppresseur. Les lymphocytes p?riph?riques ainsi que ceux infiltrant les ganglions m?tastatiques et non m?tastatiques ont ?t? isol?s les uns sur gradient de ficoll, les autres par dissection m?canique. Les LT CD4+CD25high ont ?t? caract?ris?s ph?notypiquement ex vivo en cytom?trie de flux et test?s fonctionnellement in vitro apr?s tri cellulaire en r?ponse ? une stimulation allog?nique. Leur expression constitutive du facteur de transcription FoxP3, r?cemment d?montr? comme ?tant un facteur cl? pour la diff?rentiation des cellules T r?gulatrices chez la souris [2], a ?t? ?tudi?e par PCR quantitative real time. Le r?pertoire du TCR Vb des LT CD4+CD25high a ?t? etudi? en PCR quantitative et Immunoscope afin de tester l'hypoth?se d'un recrutement antig?nique restreint. Pour l'analyse statistique, le test t de Student a ?t? utilis?.
R?sultats
Nous avons observ? une augmentation significative dans les ganglions m?tastatiques par rapport au sang des LT CD4+CD25high de ph?notype CD69+ DRlow CD45RO+ CTLA-4+ (11,1?% ? 1,8?% vs 5,5?% ? 1,8?% des LT CD4+?;p = 0,0015). Ces cellules expriment FoxP3 de fa?on constitutionnelle. Nous avons montr? in vitro que ces LT exer?ent une fonction r?gulatrice vis-?-vis des LT CD4+CD25- et des LT CD8+ infiltrant la m?me tumeur. Le m?canisme d'action de ces cellules s'effectue de fa?on contact cellulaire d?pendent et met ?galement en jeu, dans certains cas, des cytokines immunomodulatrices comme l'IL10 et le TGFb. Le r?pertoire du TCR Vb des LT CD4+CD25high est essentiellement polyclonal, non en faveur d'une stimulation antig?nique restreinte univoque.
Commentaires
Nos donn?es sugg?rent l'existence chez les patients atteints de m?lanome stade III de LT r?gulateurs susceptibles de s'opposer aux r?ponses cytotoxiques et auxilliaires dans les ganglions m?tastatiques. Ceci pourrait contribuer ? expliquer l'?chappement immunitaire habituellement observ? dans cette tumeur et ouvrir la perspective de devoir neutraliser cette population lymphocytaire afin d'optimiser de futurs protocoles d'immunoth?rapie.
[1] Shevach EM. Nature Immunol 2002?; 2?: 389.
[2] Hori S et al. Science 2003?; 299?: 1057.
