MASSON EDITEUR

OBTENTION D'ILOTS DE LANGERHANS A PARTIR DE PORC EOPS (EXEMPTS D'ORGANISMES PATHOGENES SPECIFIQUES) : CULTURE A LONG TERME ET ENCAPSULATION DES ILOTS DANS DES FIBRES D'AN69.

V. DUVIVIER, S. DARQUY, C. ROUAULT, E. GOUIN1, J. HONIGER, P. SA?1, G. REACH.
INSERM U 341, SERVICE DE DIABETOLOGIE, HOPITAL HOTEL-DIEU, PARIS. 1Cellulaire et Moléculaire Immuno-Endocrinologie INRA/ENVN Nantes.

Le pancr?as de porc repr?sente la source principale de tissu pour la r?alisation d'un pancr?as bioartificiel, il est donc imp?ratif afin d'?viter tout risque de contamination du receveur d'utiliser comme donneur une souche de porc contr?l?e, ?lev?s, nourris et tu?s dans des conditions strictes de st?rilit?.

But du travail?: 1)?d?montrer que des ?lots de Langerhans isol?s ? partir de porc EOPS peuvent ?tre cultiv?s ? long terme dans un milieu Hams F10 contenant un substitut de s?rum l'Ultroser ? 2?%?; 2)?mesurer la s?cr?tion d'insuline en r?ponse ? une stimulation par le glucose des ?lots encapsul?s dans des fibres d'AN69?cultiv?s pendant plusieurs semaines.

M?thodes?: Un test d'incubation statique est r?alis? apr?s 3?semaines (n?=?10), 2?mois (n?=?8) et 3?mois (n?=?3) de culture. La r?ponse insulinos?cr?toire des ?lots est mesur?e en r?ponse ? des concentrations croissantes de glucose (2,8?; 5,5?; 11 et 16,5?mM). Les ?lots encapsul?s dans les fibres sont ?valu?s, apr?s 1 et 3?semaines de culture en p?rifusion?: milieu basal?: 2,8?mM de glucose, milieu stimulant?: 16,5?mM de glucose et 5,5?mM de th?ophylline.

R?sultats?: Les exp?riences d'incubation statiques montrent que les ?lots r?pondent ? une stimulation par le glucose avec un index de stimulation qui n'est pas statistiquement diff?rent en fonction du temps de culture (SI?=?rapport 16,5/2,8?mM de glucose de la s?cr?tion d'insuline?; 8,1???3,1 ? 3?semaines?; 3,2???1,2 ? 2?mois et 3,0???0,7 ? 3?mois). La quantit? d'insuline s?cr?t?es par les ?lots diminue avec le temps de culture, apr?s 3?semaines de culture?: 533???170 et 1?526???349?mU/pancr?as pour des concentrations de glucose de 2,8 et 16,5?mM respectivement, apr?s 1?mois?: 280???104 et 958???418?mU/pancr?as et apr?s 3?mois?: 26???12 et 68???19?mU/pancr?as. La p?rifusion des ?lots encapsul?s montre des r?ponses insulino s?cr?toires, ? une stimulation par le glucose, significatives (p

Conclusion?: Ces r?sultats d?montrent que des ?lots obtenus ? partir de porc EOPS restent fonctionnels apr?s plusieurs mois de culture dans un milieu Hams F10?contenant 2?% d'Ultroser et qu'ils peuvent ?tre utilis?s pour la r?alisation d'un pancr?as bioartificiel.



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